ทำความเข้าใจเคล็ดลับปิเปตที่มีผลผูกพันต่ำ
1. เคล็ดลับปิเปตที่มีผลผูกพันต่ำคืออะไร?
เคล็ดลับปิเปตที่มีผลผูกพันต่ำ เป็นวัสดุสิ้นเปลืองในห้องปฏิบัติการที่ออกแบบมาสำหรับปิเปต (ปิเปต) ที่มีการรักษาพื้นผิวพิเศษและ/หรือทำจากวัสดุเฉพาะ วัตถุประสงค์การออกแบบหลักของพวกเขาคือ ลดการดูดซับตัวอย่างและการเก็บรักษาอย่างมีนัยสำคัญบนผนังด้านในของปลาย .
- ปัญหาหลัก: เคล็ดลับ polypropylene มาตรฐานมีพื้นผิวที่มีการไฮโดรโฟบิซิตี้และประจุโดยธรรมชาติซึ่งสามารถนำไปสู่การดูดซับที่ไม่เฉพาะเจาะจงของส่วนประกอบตัวอย่างบางอย่างโดยเฉพาะอย่างยิ่งชีวโมเลกุล (เช่นโปรตีน, กรดนิวคลีอิก) และสารละลายที่มีความหนืด
- สารละลาย: เคล็ดลับการผูกมัดต่ำจะเปลี่ยนคุณสมบัติพื้นผิวของผนังด้านในผ่านวิธีการทางกายภาพหรือทางเคมีทำให้มีน้ำและเฉื่อยมากขึ้นซึ่งจะช่วยลดแรงปฏิสัมพันธ์ระหว่างโมเลกุลและผนังปลาย
2. วิธีการทำงาน (เทคโนโลยีการรักษาพื้นผิว)
เอฟเฟกต์การเชื่อมต่ำนั้นทำได้โดยหลักผ่านเทคโนโลยีต่อไปนี้:
- สารเติมแต่งพอลิเมอร์พิเศษ: การผสมผสานสารเติมแต่งพอลิเมอร์เฉพาะ (เช่นตัวดัดแปลง hydrophilic) เข้ากับวัสดุฐานโพลีโพรพีลีนในระหว่างการผลิตทำให้ร่างกายมีคุณสมบัติที่มีผลผูกพันต่ำ นี่คือวิธีกระแสหลักในปัจจุบันและมีเสถียรภาพที่สุด
- การเคลือบผิว:
- การเคลือบที่ชอบน้ำ: การใช้สารเคลือบผิวที่ชอบน้ำ (เช่นการเคลือบพอลิเมอร์บางอย่าง) กับผนังด้านในเพื่อเพิ่มความสามารถในการเปียกน้ำบนพื้นผิวลดการเก็บรักษาของเหลวและการดูดซับโปรตีน
- การเคลือบเฉื่อย: การใช้การเคลือบเฉื่อยสูง (เช่นอนุพันธ์ไซเลนบางอย่าง) เพื่อลดไซต์ที่ใช้งานพื้นผิวและลดการดูดซับทางเคมี
- การรักษาพื้นผิวพิเศษ: การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างจุลภาคและคุณสมบัติทางเคมีของพื้นผิวโพลีโพรพีลีนผ่านวิธีการทางกายภาพ (เช่นการรักษาด้วยพลาสมา) หรือการกัดกร่อนทางเคมีเพื่อเพิ่มความสามารถในการไฮโดร
- โพรพิลีนบริสุทธิ์สูงเป็นพิเศษ: การใช้วัตถุดิบโพลีโพรพีลีนที่มีปริมาณสารเจือจางต่ำมากเพื่อลดไซต์การดูดซับที่อาจเกิดขึ้นที่เกิดจากสิ่งสกปรก
3. ข้อดีและคุณสมบัติที่สำคัญ
- ลดการสูญเสียตัวอย่าง: นี่คือข้อได้เปรียบหลัก ลดการดูดซับและการเก็บรักษาตัวอย่างมีค่าความเข้มข้นต่ำหรือนาที (เช่นโปรตีน, DNA, RNA, เอนไซม์, แอนติบอดี, สารแขวนลอยของเซลล์, รีเอเจนต์หนืด) บนผนังปลาย ความแม่นยำ และ การกู้คืน .
- ปรับปรุงความแม่นยำในการทดลองและการทำซ้ำ: การดูดซับที่ลดลงหมายถึงปริมาณการจ่ายที่สอดคล้องกันมากขึ้นลดข้อผิดพลาดในการทดลองที่เกิดจากการพกพาตัวอย่างและการเพิ่มผลลัพธ์ ความน่าเชื่อถือ และ การทำซ้ำได้ .
- ลดความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนข้าม: การขับไล่ออกของเหลวที่สมบูรณ์มากขึ้นและตัวอย่างที่เหลือน้อยลงลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนข้ามเมื่อทำการส่งตัวอย่างที่แตกต่างกัน
- เหมาะสำหรับการใช้งานที่ละเอียดอ่อน: ลดผลกระทบต่อกิจกรรมตัวอย่างทำให้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการทดลองที่ไวต่อการดูดซับในชีววิทยาโมเลกุล, ชีววิทยาของเซลล์, โปรตีโอมิกส์, การวินิจฉัย ฯลฯ
- ปรับปรุงการเปียกน้ำ: โดยทั่วไปแล้วจะแสดงให้เห็นถึงความไม่ชอบน้ำที่ดีขึ้นช่วยให้ของเหลวไหลได้อย่างราบรื่นมากขึ้นภายในปลายลดการยึดมั่นของ Meniscus และการก่อตัวของฟองซึ่งนำไปสู่การทำงานของการปิเปตที่ราบรื่นยิ่งขึ้น
4. แอปพลิเคชันสำคัญ (การทดลองใดที่ต้องการโดยเฉพาะอย่างยิ่ง?)
แนะนำให้ใช้เคล็ดลับที่มีผลผูกพันต่ำเกือบจำเป็นสำหรับแอปพลิเคชันต่อไปนี้:
- ชีววิทยาโมเลกุล:
- PCR ที่มีความเร็วสูง, qPCR, DDPCR: ลดการสูญเสีย DNA/เทมเพลต, มั่นใจได้ว่าประสิทธิภาพการขยายและความแม่นยำในการวัดปริมาณ
- การทำให้บริสุทธิ์ของกรดนิวคลีอิกและการเตรียมห้องสมุด: ป้องกันการสูญเสียชิ้นส่วน DNA/RNA ที่มีค่าระหว่างการทำให้บริสุทธิ์
- การเตรียมตัวอย่าง NGS: การปิเปตที่แม่นยำของห้องสมุดนาทีเป็นสิ่งสำคัญ
- การวิจัยโปรตีน:
- การทดสอบความเข้มข้นของโปรตีน (BCA, แบรดฟอร์ด ฯลฯ ): ป้องกันการดูดซับโปรตีนที่นำไปสู่การประเมินความเข้มข้นต่ำเกินไป
- การทดสอบกิจกรรมของเอนไซม์/จลนพลศาสตร์: ทำให้มั่นใจได้ว่าปริมาณเอนไซม์ที่แม่นยำและหลีกเลี่ยงการสูญเสียกิจกรรม
- การเตรียมตัวอย่าง Western blot: การปิเปตที่แม่นยำของโปรตีนในบัฟเฟอร์ที่มี SDS หรือสารลด
- การทำให้บริสุทธิ์โปรตีน (เช่นการรวบรวมเศษส่วนโครมาโตกราฟี Affinity): หลีกเลี่ยงการสูญเสียโปรตีนเป้าหมาย
- การเพาะเลี้ยงเซลล์และการทดลองที่เกี่ยวข้อง:
- การผ่าน/การชุบเซลล์ล้ำค่าหรือเซลล์หลัก: ลดการสูญเสียการยึดเกาะของเซลล์ภายในปลาย
- การทดสอบความมีชีวิตของเซลล์: การปิเปตที่แม่นยำของสารแขวนลอยและรีเอเจนต์
- transfection: การปิเปตที่แม่นยำของ DNA, RNA, คอมเพล็กซ์รีเอเจนต์ transfection
- การวินิจฉัยและการทดสอบทางคลินิก: ELISA, immunoassays chemiluminescent, POCT: ทำให้มั่นใจได้ว่าตัวอย่างที่แม่นยำและปริมาตรรีเอเจนต์ปรับปรุงความไวในการตรวจจับและความแม่นยำ
- โซลูชั่นที่มีความหนืดหรือโฟมได้ง่าย: กลีเซอรอล, DMSO, สารละลายสารลดแรงตึงผิว, บัฟเฟอร์บางอย่าง: ลดการเก็บรักษาและการพกพาปรับปรุงความแม่นยำของปิเปต
- การทดลองใด ๆ ที่เกี่ยวข้องกับตัวอย่างที่มีค่านาทีหรือต้องการความแม่นยำสูงและการทำซ้ำ
5. วิธีเลือกปลายปิเปตที่มีผลผูกพันต่ำที่เหมาะสม?
- ความเข้ากันได้: ข้อกำหนดหลักคือพวกเขา ต้อง เข้ากันได้อย่างสมบูรณ์แบบกับแบรนด์และรุ่นปิเปตของคุณ ตรวจสอบรายการความเข้ากันได้เสมอหรือปรึกษาคู่มือผู้ผลิตก่อนซื้อ
- การรับรองและคุณภาพ:
- ได้รับการรับรอง RNase/DNase/Pyrogen-free: สิ่งสำคัญสำหรับการทดลองทางชีววิทยาโมเลกุลและการเพาะเลี้ยงเซลล์ รับรองการรับรองที่เชื่อถือได้
- ได้รับการรับรอง PCR ยับยั้งฟรี: สำคัญมากสำหรับแอปพลิเคชัน PCR/QPCR
- คุณภาพการผลิต: การผลิตที่มีคุณภาพสูงช่วยให้มั่นใจได้ว่าขนาดที่แม่นยำรูปร่างที่สม่ำเสมอการขาดของเสี้ยนและการขาดการปนเปื้อนของฝุ่นละออง (เกรดความสะอาด) เลือกแบรนด์ที่มีชื่อเสียง
- ระดับประสิทธิภาพที่มีผลผูกพันต่ำ: ประสิทธิภาพอาจแตกต่างกันระหว่างแบรนด์และซีรีส์ ให้ความสนใจกับข้อมูลประสิทธิภาพที่ผู้ผลิตจัดหา (เช่นรายงานการทดสอบการดูดซับโปรตีนตกค้าง) สำหรับการใช้งานที่ต้องการอย่างมาก (เช่นการจัดลำดับเซลล์เดี่ยวการตรวจจับโปรตีนที่มีความอุดมสมบูรณ์ต่ำเป็นพิเศษ) อาจจำเป็นต้องใช้เคล็ดลับการผูกต่ำระดับสูงสุด
- บรรจุภัณฑ์และการฆ่าเชื้อ:
- รูปแบบบรรจุภัณฑ์: Racked (ซ้อนหรือเป็นกลุ่ม), ถุง, กรอง (ไม่บังคับ) เลือกบรรจุภัณฑ์ที่เหมาะสมกับเวิร์กโฟลว์และความต้องการอัตโนมัติของคุณ
- เคล็ดลับที่กรอง: หากต้องการการปนเปื้อนของสเปรย์ปนเปื้อนของเพลาปิเปตให้เลือกเคล็ดลับการผูกต่ำด้วยตัวกรอง (เคล็ดลับตัวกรองที่มีผลผูกพันต่ำ) ตัวกรองเองก็ควรมีผลผูกพันต่ำ
- ก่อนการฆ่าเชื้อ: การทดลองส่วนใหญ่ต้องการเคล็ดลับก่อนการฆ่าเชื้อ (โดยทั่วไปคือการฉายรังสีแกมม่า) ตรวจสอบวิธีการทำหมันและระดับการประกันการฆ่าเชื้อ (SAL) เคล็ดลับที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อเหมาะสำหรับแอปพลิเคชันที่ไม่สำคัญบางอย่างหรือหากห้องปฏิบัติการทำการทำหมันของตัวเอง
- ต้นทุน-ประสิทธิผล: เคล็ดลับการผูกมัดต่ำโดยทั่วไปจะมีราคาแพงกว่าเคล็ดลับมาตรฐาน ประเมินความคุ้มค่าในขณะที่ปฏิบัติตามข้อกำหนดด้านประสิทธิภาพ อย่าประนีประนอมกับการทดลองที่สำคัญโดยใช้เคล็ดลับมาตรฐานเพื่อประหยัดค่าใช้จ่ายเนื่องจากข้อมูลที่ไม่ถูกต้องหรือการสูญเสียตัวอย่างอาจนำไปสู่ของเสียที่มากขึ้น
6. บันทึกการใช้งาน
- สิ่งที่แนบที่เหมาะสม: ตรวจสอบให้แน่ใจว่าปลายอย่างแน่นหนาและติดอยู่กับปิเปตอย่างปลอดภัยโดยไม่มีช่องว่างเพื่อป้องกันการรั่วไหลของอากาศและปริมาตรที่ไม่ถูกต้อง
- ก่อนการเปียก: สำหรับของเหลวที่มีความหนืดหรือระเหยได้การเปียกน้ำล่วงหน้า (การดูดซับและจ่ายของเหลวสองสามครั้งก่อนการถ่ายโอนจริง) บางครั้งสามารถปรับปรุงความแม่นยำเพิ่มเติมได้ (แม้จะมีเคล็ดลับการผูกมัดต่ำ) ปฏิบัติตามแนวทางปฏิบัติงานปิเปต
- หลีกเลี่ยงการสัมผัสปลายปลาย: รักษาความเป็นหมันและป้องกันการปนเปื้อน
- พื้นที่จัดเก็บ: เก็บในที่แห้งและแห้งห่างจากแสงแดดและฝุ่นโดยตรง หมายเหตุวันหมดอายุของบรรจุภัณฑ์